Rekombinant DNA
Hvad er rekombinant DNA:
Rekombinant DNA er DNA- molekyler, der har DNA-fragmenter afledt fra to eller flere kilder, sædvanligvis fra forskellige arter.
Molekylær kloning er den centrale teknik for rekombinant DNA-metodologi og består af overførslen af et gen fra en organisme til en anden, det vil sige rekombination af DNA fra forskellige kilder.
Rekombinant DNA-teknologi
Fremgangsmåden indebærer generelt isolering af et humant gen med terapeutisk potentiale (fx insulin) og indføring af genet i et dyr, bakterie eller gærcelle.
Gennem anvendelsen af proteiner kaldet restriktionsenzymer, isoleres individuelle gener fra humant DNA og indsættes i små stykker DNA, der er skåret med det samme enzym, kaldet plasmider .
Det rekombinante plasmid indsættes derefter i et dyr, bakteriel eller gærcelle, i en proces, der kaldes transformation .
Drugresistensgener, som også findes i plasmidet, vælger transformerede celler fra de ikke-transformerede.
En ren population af rekombinante celler etableres dernæst gennem kloningsprocessen, hvor en enkelt sel valgt vil give anledning til en population af kloner.
Ved afslutningen af processen forventes alle resulterende celler at indeholde en kopi af plasmidet, der bærer det indsatte humane gen.
Når genet og den klonede celle er indsat, induceres cellerne derefter for at udtrykke det humane gen.
Anvendelser af rekombinant DNA-teknologi
- Fremstilling af nyttige stoffer såsom humant insulin, væksthormon, vacciner, industrielle enzymer;
- Replikation og genekspression mekanismer;
- Faderskabsforskning;
- Diagnose af genetiske og smitsomme sygdomme;
- Genterapi;
- Transgene.
Lær mere om proteiner.
